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阿米舒必利-鸡卵清白蛋白偶联物的免疫活性检测方法的原理是什么?

2024-10-09 [65]

阿米舒必利-鸡卵清白蛋白偶联物|Amisulpride-Ovalbumin Conjugate(Amisulpride-OVA Conjugate)

阿米舒必利 - 鸡卵清白蛋白偶联物的免疫活性检测方法通常采用免疫分析技术,如酶联免疫吸附测定(ELISA)等,其原理如下:

 

一、基本原理

抗原抗体特异性结合

阿米舒必利 - 鸡卵清白蛋白偶联物作为一种抗原,能够与样本中特异性的抗体发生结合。这种结合是高度特异性的,即只有针对阿米舒必利或偶联物上特定表位的抗体才能与之结合。

例如,在检测动物血清中是否存在针对阿米舒必利的抗体时,若血清中含有该抗体,就会与偶联物上的阿米舒必利或鸡卵清白蛋白上因偶联而产生的新表位发生特异性结合。

检测系统产生可检测信号

通过与特定的检测系统结合,产生可检测的信号,从而实现对结合反应的定量或定性分析。

 

二、以酶联免疫吸附测定(ELISA)为例

包被

将阿米舒必利 - 鸡卵清白蛋白偶联物包被在固相载体(如酶标板)表面。通常通过物理吸附或化学结合的方式,使偶联物牢固地固定在载体上。

封闭

加入封闭液,封闭载体表面未结合偶联物的位点,以减少非特异性结合。常用的封闭液有牛血清白蛋白、脱脂奶粉等蛋白质溶液。

加样

加入待检测的样本(如血清、血浆等)。如果样本中含有针对阿米舒必利或偶联物的抗体,这些抗体就会与包被在载体上的偶联物结合。

洗涤

用洗涤液洗去未结合的物质,包括未结合的抗体和其他杂质,以降低背景信号,提高检测的特异性。

加酶标二抗

加入与一抗(样本中的抗体)特异性结合的酶标二抗。二抗通常是用酶(如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)标记的,能够与一抗结合,并且携带酶分子。

洗涤

再次洗涤,去除未结合的酶标二抗。

加底物

加入酶的底物。根据酶的种类不同,底物会在酶的催化下发生颜色变化、产生发光等信号。

检测信号

使用酶标仪等设备检测反应产生的信号强度。信号强度与样本中抗体的含量成正比,通过与标准曲线比较,可以确定样本中抗体的浓度,从而间接反映阿米舒必利 - 鸡卵清白蛋白偶联物的免疫活性。

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