DBCO-PEG4-Tetrazine的制备方法有哪些

DBCO-PEG4-Tetrazine 的制备主要基于点击化学原理，通过 DBCO 基团与叠氮基团的反应，或甲基四嗪基团与 TCO 官能化分子的反应来实现，以下是具体制备方法：

1. DBCO 与叠氮基团的反应：

• 原理：DBCO（二苯并环辛炔）是一种应变促进的环辛炔基团，能够与叠氮基团（N₃）发生无铜点击化学反应（SPAAC），生成稳定的三唑环结构。

• 条件：该反应在水中进行，反应迅速而定量，适用于制备纳偶联物。反应对 pH 不敏感，无需特殊缓冲液或控制 pH，在 4-11 的 pH 范围内效果好。

• 应用：通过此反应，可以将 DBCO-PEG4-Tetrazine 与叠氮化物修饰的生物分子（如蛋白质、核酸等）进行偶联。

2. 甲基四嗪与 TCO 官能化分子的反应：

• 原理：甲基四嗪是一种高反应活性的四嗪衍生物，能够与含有反式双键的化合物（如反式环辛烯，TCO）发生快速的逆电子需求 Diels-Alder（IEDDA）反应，生成稳定的加合物。

• 条件：该反应具有高度的选择性和生物相容性，适用于活细胞和活体内的标记和成像。甲基四嗪基团可以在中性或微碱性 pH 值下与伯胺反应形成共价键。

• 应用：通过此反应，可以将 DBCO-PEG4-Tetrazine 与 TCO 官能化的分子进行偶联，实现生物分子的标记和动态监测。

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