Biotin-LC-PEG12-NHS Ester有哪些用途呢
2026-05-13
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Biotin-LC-PEG12-NHS Ester的用途
一、蛋白质与抗体的生物素化标记
NHS酯末端在pH 7.0-8.5的温和条件下,与蛋白质或抗体上的赖氨酸氨基反应,形成稳定的酰胺键。由于LC+PEG12提供了充足的空间缓冲,生物素被充分推离蛋白表面,不会被遮挡,与链霉亲和素的结合效率j较高。同时PEG链段防止蛋白聚集,特别适合珍贵抗体和高密度标记。标记后可用于Western Blot、ELISA、免疫荧光、流式细胞术等。
二、Pull-down与亲和纯化
利用生物素与链霉亲和素的超高亲和力(Kd≈10⁻¹⁵ M),标记后的目标蛋白可通过链霉亲和素磁珠高效捕获。常用于免疫沉淀(IP)研究蛋白互作,或用亲和素层析柱高纯度分离重组蛋白。PEG12链段有效降低非特异性吸附,大幅提升信噪比。
三、活细胞表面蛋白质标记
PEG12赋予的水溶性使其可直接溶于PBS使用,且PEG链段具有一定的膜不通透性,NHS酯只能标记暴露在细胞外表面的蛋白氨基,无法穿透细胞膜。因此可特异性标记活细胞表面的膜蛋白,研究受体表达、内吞转运等,再用荧光链霉亲和素成像。
四、氨基修饰核酸的标记
可与5'-氨基修饰的DNA、RNA或氨基修饰的siRNA反应,在核酸末端引入生物素标签。标记后的核酸可用于Pull-down实验捕获结合蛋白,或通过链霉亲和素-荧光染料系统进行原位杂交检测。
五、纳米载体的表面功能化
可在脂质体、聚合物纳米粒、外泌体等载体表面引入生物素标签。PEG12链段提供"隐形"效应,降低非特异性蛋白吸附,延长体内循环时间;生物素端可进一步连接靶向配体(如抗体、适配体),实现主动靶向药物递送。也可利用生物素-链霉亲和素的"分子胶水"特性,像搭积木一样组装多功能纳米平台。
六、生物传感器与芯片构建
PEG12链段能有效减少非特异性吸附,使其成为构建高性能检测平台的理想工具。可用于SPR芯片、电化学传感器、微阵列芯片等,将捕获分子生物素化后固定在链霉亲和素修饰的芯片表面,实现高灵敏度检测。
七、PROTAC连接臂组件
PEG12链段可作为PROTAC分子的柔性连接臂,连接E3泛素连接酶配体和靶蛋白配体,辅助设计蛋白降解嵌合体分子。
八、多功能探针的二次构建平台
标记后的分子本身不带荧光,但可通过生物素-链霉亲和素系统进行信号放大:一个链霉亲和素可结合多个荧光染料或酶分子,实现检测灵敏度的大幅提升。同时也可在此基础上进一步偶联其他功能分子,构建一站式多功能探针。
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