cas：129179-83-5，Biotin-HPDP，生物素修饰3-(2-吡啶二硫)丙酰胺

基本信息

Biotin-HPDP全称为N-(6-(生物素胺)己基)-3'-(2'-吡啶二硫)丙酰胺，是一种兼具生物素高亲和性与二硫键可逆性的巯基反应性生物素化试剂。

• CAS号：129179-83-5

• 分子式：C₂₄H₃₇N₅O₃S₃

• 分子量：539.78

• 外观：淡黄色至橙色固体粉末

• 溶解性：易溶于DMSO、DMF、乙醇等有机溶剂，在水中溶解度有限（约6.79mg/ml）

结构式：

分子结构与反应特性

分子由三部分组成：

1. 生物素基团：与链霉亲和素/亲和素形成几乎不可逆的结合（解离常数Kd≈10⁻¹⁵M）

2. 己基连接臂：增加分子空间灵活性，减少标记对目标分子构象的干扰

3. 吡啶二硫酯基团：与游离巯基发生特异性二硫键交换反应，反应条件温和（pH7-8）

核心反应机制：

Biotin-HPDP + Protein-SH → Biotin-Protein + Pyridine-2-thione

反应释放的2-吡啶硫醇在343nm有特征吸收，可实时监测反应进度。形成的二硫键可被DTT或TCEP等还原剂断裂，实现标记的可逆去除。

应用领域

1. 蛋白质组学研究

• 特异性标记细胞内游离巯基蛋白，结合链霉亲和素磁珠富集低丰度蛋白（富集倍数可达1000倍）

• 翻译后修饰分析：通过标记差异表达的巯基蛋白，鉴定氧化还原相关的蛋白质修饰

2. 蛋白质相互作用分析

• 用于pull-down实验、免疫共沉淀（IP）等，标记诱饵蛋白后捕获相互作用蛋白复合物

• 可逆性标记便于后续通过还原剂释放目标蛋白，进行质谱鉴定或功能分析

3. 免疫分析与诊断

• 标记抗体或抗原，用于ELISA、Western blot等检测技术，提高检测灵敏度（检测限低至pg级）

• 细胞表面蛋白标记：结合流式细胞术，实现特定细胞亚群的分选与鉴定

4. 生物传感器与纳米材料

• 构建还原响应型生物传感器，用于细胞内谷胱甘肽等巯基化合物的实时检测

• 功能化修饰纳米颗粒、量子点等材料，实现生物分子的靶向递送与可控释放

储存与使用注意事项

• 储存条件：密封避光，-20℃干燥环境保存，避免反复冻融（保质期2年）

• 溶液配制：用DMSO配制50mM母液，-80℃分装保存；工作液需现配现用，避免水溶液中水解

• 反应优化：

• 目标蛋白巯基与Biotin-HPDP摩尔比为1:1.5-2:1

• 反应体系需添加EDTA（1-5mM）抑制金属离子催化的二硫键断裂

• 终止与纯化：

• 用抗坏血酸（50mM）淬灭未反应的Biotin-HPDP

• 通过透析或凝胶过滤去除游离试剂，避免非特异性结合

关于我们:

陕西星贝爱科生物科技经营的产品种类包括有：合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记物、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二氧化硅，聚合物微球，近红外荧光染料，聚苯乙烯微球，上转换纳米发光颗粒，MRI核磁造影产品，荧光蛋白及荧光探针等等。

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