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Streptavidin-Biotin|链霉亲和素标记生物素

简要描述:Streptavidin-Biotin|链霉亲和素标记生物素在将抗体共轭连接到生物素的帮助下(Biotin)使用亲和素(avidin,AV)或链霉亲和素(streptavidin,SA)其检测方法几乎可以应用于任何免疫测定。

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  • 更新时间:2024-09-04
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Streptavidin-Biotin|链霉亲和素标记生物素

链霉亲和素标记生物素是一种常见的生物化学技术,用于在多种生物学和医学研究中实现生物素与链霉亲和素之间的特异性结合。以下是对链霉亲和素标记生物素的详细解析:

一、链霉亲和素概述

链霉亲和素(Streptavidin, SA)是一种由链霉菌avidinii分泌的生物素结合蛋白,具有四个高亲和力的生物素结合位点。它的分子量通常在60-65kDa之间,具体取决于不同的来源和制备方式。链霉亲和素因其不含碳水化合物侧链、等电点接近中性以及低非特异性结合等特性,被广泛用作多功能亲和标记。

二、生物素概述

生物素(Biotin)是一种水溶性维生素B复合物,也称为维生素H或辅酶R。它在生物体内参与多种酶的辅基,对脂肪酸、葡萄糖和氨基酸的代谢过程至关重要。生物素因其特别的化学结构和生物活性,常被用于生物化学和分子生物学研究中的标记和检测技术。

三、链霉亲和素标记生物素的原理

链霉亲和素标记生物素的原理基于链霉亲和素与生物素之间的高度特异性结合。通过化学方法将生物素与链霉亲和素偶联,形成稳定的生物素-链霉亲和素复合物。这种复合物在生物学和医学研究中具有广泛的应用,如蛋白质印迹、免疫组织化学、ELISA等。

四、链霉亲和素标记生物素的应用

  1. 蛋白质印迹(Western Blotting):链霉亲和素标记的生物素可用于检测特定蛋白质在细胞或组织中的表达情况。通过与特定的抗体结合,可以实现对目标蛋白的定性和定量分析。

  2. 免疫组织化学(Immunohistochemistry):在免疫组织化学中,链霉亲和素标记的生物素可用于染色细胞或组织中的特定抗原。这种技术有助于研究抗原在细胞和组织中的分布和定位。

  3. ELISA(酶联免疫吸附试验):在ELISA检测中,链霉亲和素标记的生物素可用于放大检测信号。通过与酶标记的抗体结合,可以实现对低浓度抗原或抗体的灵敏检测。

  4. 其他应用:链霉亲和素标记的生物素还可用于基因芯片、免疫微孔板、免疫层析硝酸纤维素膜等多种生物学和医学研究中。

五、链霉亲和素标记生物素的注意事项

  1. 储存条件:链霉亲和素标记的生物素应储存在适当的温度条件下(如-20℃),以保持其活性和稳定性。

  2. 操作规范:在进行链霉亲和素标记生物素的操作时,应严格遵守实验规范和操作规程,以确保实验结果的准确性和可靠性。

  3. 非特异性结合:虽然链霉亲和素具有低非特异性结合的特性,但在某些实验中仍需注意避免非特异性结合的影响。

Streptavidin-Biotin|链霉亲和素标记生物素

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