基本信息
中文名称:活化酯修饰的生物素
英文名称:Biotin-NHS ester
cas:35013-72-0
分子式:C14H19N3O5S
分子量:341.38
纯度:95%
外形:白色固体
存储条件:阴凉,干燥,通风良好的库房
包装规格:1g、5g、10g等
注意事项:取用时一定要干燥,避免频繁解冻和冷冻。
溶解性:溶于大部分有机溶剂,溶于水
产品:可定制
结构式:
描述
生物素-NHS 酯,也称为生物素基- N -羟基琥珀酰亚胺,是一种常用于生物偶联反应的化合物,用于用生物素标记蛋白质、抗体和其他生物分子。生物素是一种水溶性 B 族维生素,对链霉亲和素有很高的亲和力,这使其成为各种生化测定和实验中的有用工具。
结构和性质:
生物素-NHS 酯由通过酯键与 N - 羟基琥珀酰亚胺(NHS)基团连接的生物素分子组成。NHS 基团对伯胺有反应性,例如蛋白质中赖氨酸残基或肽的氨基末端的那些。这种反应性允许生物素- NHS 酯与这些胺形成稳定的酰胺键,从而将生物素部分与目标分子偶联。
用途:
蛋白质标记: 生物素-NHS 酯广泛用于用生物素标记蛋白质,然后可以使用基于链霉亲和素的方法进行检测或纯化。这在蛋白质相互作用研究、蛋白质定量测定和免疫沉淀实验中特别有用。
抗体标记: 可以使用生物素-NHS 酯用生物素标记抗体,使其能够在各种免疫测定中检测或扩增,例如 ELISA、Western blot 和流式细胞术。
核酸标记: 虽然不如蛋白质标记常见,但生物素-NHS 酯也可用于标记核酸,特别是寡核苷酸,用于 DNA 测序和杂交测定等应用。
细胞表面标记: 生物素-NHS 酯可用于标记细胞表面蛋白,便于研究细胞表面相互作用和分离特定细胞群。
实验方案:
生物素-NHS 酯的使用通常包括以下步骤:
准备: 将生物素-NHS 酯溶解在合适的溶剂(例如 DMSO)中以制备储备溶液。
反应: 在适当的条件(pH、温度)下将目标蛋白质或生物分子与生物素-NHS 酯溶液孵育。
终止: 通过添加终止剂(例如 Tris 缓冲液)来停止反应,以中和任何未反应的生物素-NHS 酯。
纯化: 通过纯化步骤(例如透析、色谱)去除多余的试剂和未反应的生物素-NHS 酯。
注意事项:
特异性: 确保标记反应具有特异性,并且不会修饰目标分子的关键官能团。
优化: 优化反应条件(例如生物素-NHS 酯的浓度、反应时间),以在不影响生物分子的活性或功能的情况下达到所需的标记水平。
储存: 将生物素-NHS 酯在低温(例如 -20°C)下储存以防止降解。
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