基本信息
中文名称:活性酯生物素交联剂
英文名称:NHS-LC-Biotin
CAS:72040-63-2
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏-20℃
纯度:95%
结构式:

描述
NHS-LC-Biotin是一种常用的化学试剂,常用于生物化学和分子生物学研究中。它是由N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯化生物素(Biotin)得到的一种活性酯化合物。NHS-LC-Biotin能够与含有伯胺基团的分子(如蛋白质、多肽等)发生反应,形成稳定的酰胺键,从而将生物素标记到目标分子上。
### 主要特点和应用
1. 标记蛋白质和多肽:NHS-LC-Biotin可以用来标记含有伯胺基团的蛋白质和多肽。这种标记方法广泛应用于蛋白质相互作用研究、蛋白质亲和纯化以及蛋白质检测等领域。
2. 长链连接臂:NHS-LC-Biotin中的“LC"代表长链(Long Chain),指的是其具有一个较长的柔性连接臂。这个长链连接臂有助于减少生物素标记对目标分子功能的影响,保持标记后的蛋白质或多肽的生物活性。
3. 高反应性和选择性:NHS-LC-Biotin在适当的pH条件下具有很高的反应性,能够迅速与伯胺基团反应。同时,由于其特定的反应基团,它可以实现高度选择性的标记。
4. 生物素亲和纯化:标记了NHS-LC-Biotin的蛋白质可以通过亲和纯化技术进行分离和纯化。这是因为生物素能够与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)高度特异性结合,这些蛋白对生物素具有较高的亲和力。
### 使用注意事项
1. 溶解和储存:NHS-LC-Biotin通常需要在无水的有机溶剂(如DMF或DMSO)中溶解,并且应储存在干燥、避光的环境中,以防止降解和氧化。
2. 反应条件:标记反应通常在pH 7-9的缓冲液中进行,过低或过高的pH都会影响反应效率和标记效果。
3. 去除未反应的试剂:在标记反应完成后,应通过透析、凝胶过滤或其他方法去除未反应的NHS-LC-Biotin,以避免非特异性结合和背景干扰。
4. 生物素化程度:标记过程中应控制好生物素化程度,过高或过低的生物素化都可能影响目标分子的功能和活性。
### 应用实例
- 蛋白质相互作用研究:利用NHS-LC-Biotin标记目标蛋白质,然后通过亲和纯化和质谱分析,鉴定与其相互作用的蛋白质。
- 蛋白质检测:通过生物素标记的抗体,结合亲和素或链霉亲和素偶联的酶或荧光染料,实现对目标蛋白质的高灵敏度检测。
- 蛋白质亲和纯化:利用生物素标记的目标蛋白质,通过亲和层析柱进行纯化,获得高纯度的蛋白质样品。
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