cas：120550-35-8，Biotin-PFP，五氟苯酚生物素酯的描述

Biotin-PFP（生物素-五氟苯酯）是一种高活性生物素衍生物，它将生物素的高特异性亲和识别能力与五氟苯酯（PFP）的强反应活性相结合，成为生物分子偶联、标记及纯化中的重要工具试剂，广泛应用于生物化学、分子生物学及药物研发领域。以下是对其核心特性的详细阐述：

一、化学结构与组成

• 生物素模块：属于维生素B族成员，与亲和素、链霉亲和素形成较强的非共价结合（解离常数Kd≈10⁻¹⁵ M），是后续靶向捕获、检测、纯化的核心单元。

• 五氟苯酯模块：含五个氟原子的高活性酯基团，强亲电性使其能高效捕捉氨基（优先伯胺）或羟基，在温和条件下形成稳定的酰胺键或酯键，是实现与生物分子共价偶联的关键。

二、物理性质

• 外观：白色至淡黄色粉末。

• 熔点：190.0~194.0℃。

• 沸点：555.3±50.0℃（预测值）。

• 密度：1.441。

• 溶解性：通常需用无水有机溶剂（如DMF、DMSO）溶解，因其对水和氧气较为敏感，易发生降解。

• 储存条件：需在-20℃、避光、干燥的惰性气体（如氩气）保护下储存，以保证其稳定性和活性。

结构式：

三、反应特性

• 高反应活性：PFP基团在温和条件下（如pH 7-9、室温至37℃）即可与生物分子（如蛋白质、核酸、多肽）的氨基或羟基快速反应，形成稳定的共价键。

• 反应选择性：优先与伯胺反应，生成酰胺键，适用于蛋白质N端或赖氨酸侧链的标记。

• 稳定性：形成的生物素标记产物在多种缓冲液和储存条件下（如-20℃）可长期保持活性。

四、应用场景

• 蛋白质修饰与标记：

• 用于蛋白质的荧光标记、酶标记或亲和纯化。例如，通过PFP-Biotin标记抗体后，可利用链霉亲和素磁珠进行免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP）。

• 结合生物素-链霉亲和素系统，实现蛋白质复合物的富集与分析。

• 核酸标记：

• 修饰寡核苷酸或RNA，用于原位杂交（ISH）、荧光原位杂交（FISH）或核酸pull-down实验。

• 作为高通量测序的接头或探针的标记物，提高检测灵敏度。

• 细胞表面标记与追踪：

• 标记细胞表面受体或抗原，结合荧光标记的链霉亲和素进行流式细胞术或显微镜观察。

• 通过生物素-链霉亲和素系统实现细胞的长期追踪和示踪。

• 药物靶点验证：

• 标记药物分子或探针，研究其与靶标的结合特性。

• 生物传感器开发：

• 利用生物素-链霉亲和素的高亲和力，构建高灵敏度的生物传感器。

• 药物递送系统：

• 将生物素偶联到药物载体表面或纳米颗粒上，通过亲和素桥接实现靶向递送或多功能载体构建。

五、特点

• 高偶联效率：PFP活性酯端可快速与氨基反应，生成稳定共价键。

• 特异性强：对氨基或羟基高度选择性，减少副反应。

• 生物素识别能力：与亲和素结合力高，适用于多种免疫分析与检测平台。

• 多功能应用：蛋白质偶联、抗体标记、药物载体修饰及传感器构建。

关于我们:

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