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Biotin-SS-Sulfo-NHS ester,cas:325143-98-4的介绍

2025-11-05 [14]

Biotin-SS-Sulfo-NHS ester(生物素-二硫键-磺基 NHS 酯)是一种兼具水溶性、高反应性和可切割特性的生物偶联试剂,在生物化学、免疫学及生物医学研究中应用广泛。

一、基本信息

  • 中文名称:生物素-二硫键-磺基 NHS 酯

  • 英文名称:Biotin-SS-Sulfo-NHS ester

  • CAS 号:325143-98-4

  • 分子式:C₁₉H₂₇N₄NaO₉S₄

  • 分子量:606.67

  • 外观:通常为亮黄色或白色固体

结构式:

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二、化学结构与特性

  • 生物素(Biotin):提供高亲和力识别功能,可与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)形成稳定非共价复合物。

  • 二硫键(-SS-):在还原条件下可断裂,实现生物素标记与目标分子的解离。这一特性使得Biotin-SS-Sulfo-NHS ester在需要后续释放生物素标记分子的场景中具有特殊优势。

  • 磺酸基(-SO₃⁻):显著提升分子水溶性,使其可在纯水溶液中反应,无需添加有机溶剂(如DMF、DMSO),减少对生物分子(如蛋白质、抗体)活性的破坏。

  • NHS 酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯):可与伯氨基(-NH₂,如赖氨酸残基)在中性pH(6.5-8.5)下快速反应,生成稳定的酰胺键,反应效率高且副反应少。

三、物理性质与溶解性

  • 溶解性:兼具有机溶剂溶解性和水溶性,可溶于DMF、DMSO等极性有机溶剂,也能直接溶于水(磺基修饰显著提升水溶性)。

  • 储存条件:需密封保存在阴凉、干燥、通风良好的库房,取用前需确保干燥,避免频繁解冻和冷冻,防止水解或变质。一般推荐在-20℃以下冰冻保存。

四、功能与应用

  1. 生物分子标记

    • 通过NHS酯与蛋白质、抗体或其他含有伯胺的生物分子反应,将生物素标记引入这些分子。

    • 标记后的分子可以通过亲和素或链霉亲和素进行高特异性捕获、固定或信号放大。

  2. 蛋白质纯化

    • 利用生物素与链霉亲和素的高亲和力,将标记的蛋白质从复杂混合物中纯化出来。

    • 适用于细胞表面蛋白质的标记和纯化,以及核酸结合蛋白质的纯化。

  3. 可控释放体系

    • 二硫键在还原条件下可断裂,实现生物素标记分子的可控释放。这一特性在药物递送、生物传感器和蛋白质组学等领域具有重要应用。

    • 例如,在蛋白质组学研究中,可用于标记细胞裂解液中的蛋白质,通过生物素-亲和素系统富集目标蛋白后,加入还原剂(如DTT)切割二硫键,获得无生物素标记的天然蛋白,用于质谱鉴定或体外功能实验。

  4. 生物偶联与探针构建

    • 用于构建荧光探针、药物偶联物或功能材料,拓展在成像、诊断及治疗中的应用。

五、使用注意事项

  • 反应条件:偶联反应适宜在pH 7-9的缓冲液(如PBS、HEPES)中进行,反应时间一般为1-2小时。

  • 避免竞争反应:避免使用含有伯胺的缓冲液(如Tris或甘氨酸),因为它们会与目标分子竞争与NHS酯的反应。

  • 切割条件:使用还原剂(如DTT、BME或TCEP)裂解二硫键时,应优化还原剂的浓度和反应时间,以避免对目标分子造成损害。

  • 储存与处理:储存时保持干燥和低温,避免光照和氧气接触。取用前需确保干燥,避免频繁解冻和冷冻。

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