MC (C5)-Val-Cit（N-马来酰亚胺基己酰基-缬氨酸-瓜氨酸）

MC (C5)-Val-Cit 是一种经典的可裂解ADC（抗体-药物偶联物）连接子。

CAS号：2504147-59-3 | 分子式：C₂₀H₃₂N₆O₆ | 分子量：452.51

外观为白色至淡黄色固体，纯度≥95%。需在-20℃以下避光、干燥保存，避免反复冻融，保质期约1年。溶于DMSO（≥37 mg/mL，50.15 mM）、乙醇（50 mg/mL，37.98 mM）、DMF、水等溶剂。预测密度1.38±0.1 g/cm³，pKa≈3.35。

结构式：

基本组成

MC（C5）= N-Maleimidocaproyl（马来酰亚胺基己酰基）。"C5"代表己酰基链中含有5个亚甲基碳原子（加上羰基碳共6碳）。马来酰亚胺基团具有较高的硫醇反应活性，能够与抗体上还原态半胱氨酸残基的巯基（-SH）在pH 6.5-7.5条件下发生迈克尔加成反应，形成稳定的硫醚键（-S-），实现抗体与连接子的定点偶联。

Val（缬氨酸） 是一个疏水性必需氨基酸，在二肽序列中提供结构稳定性，同时有助于增强连接子在血浆中的稳定性，减少非特异性降解。

Cit（瓜氨酸） 是一种非必需氨基酸，其侧链含有尿素基团，是组织蛋白酶B（Cathepsin B）的特异性识别位点。Cathepsin B在溶酶体中高表达，因此Val-Cit序列确保药物仅在靶细胞被内吞进入溶酶体后才被酶切释放，极大降低了系统毒性。

核心功能

第一，巯基定点偶联。 马来酰亚胺端与抗体半胱氨酸的巯基高效反应，偶联位点明确、反应专一，相比随机赖氨酸偶联，可获得DAR值（药物抗体比）更均一的ADC产品，药代动力学更可控。

第二，组织蛋白酶B响应性酶切。 Val-Cit二肽被溶酶体中的Cathepsin B特异性识别并切割，这是ADC在靶细胞内释放药物的核心机制。在血液循环中，Val-Cit序列极其稳定（半衰期长），不会发生提前释放。

主要应用

一是ADC药物合成。 MC (C5)-Val-Cit是构建ADC药物的黄金标准连接子。具体流程：首先用TCEP或DTT将抗体的链间二硫键部分还原，暴露游离巯基；然后加入MC (C5)-Val-Cit（通常5-10倍摩尔过量），pH 7.0-7.5，室温反应1-2小时，完成连接子-抗体偶联；最后通过PNP端或PAB端与含伯胺的细胞毒性药物（如MMAE）反应，完成ADC组装。最终ADC在血液循环中稳定，被靶细胞内吞后在溶酶体中通过Cathepsin B切割释放活性药物。

二是ADC中间体与定制合成。 作为标准ADC连接子中间体，广泛用于ADC药物的研发和定制合成，支持DAR值优化和药代动力学研究。

三是可裂解生物偶联。 利用马来酰亚胺与巯基的专一性反应，实现抗体的定点偶联，再连接药物、荧光探针、生物素等功能分子，构建均一性高的偶联产物。

四是药物释放机制研究。 利用Val-Cit的酶切特性，研究溶酶体内药物释放动力学，优化ADC的连接子设计。