Biotin-L-Threonine，生物素-L-苏氨酸

Biotin-L-Threonine，生物素-L-苏氨酸是将维生素H生物素通过化学偶联连接到L-苏氨酸上制成的生物素标记氨基酸衍生物，主要用于生物素-亲和素系统中追踪L-苏氨酸的摄取、转运及代谢过程。

基本信息

英文名：Biotin-L-Threonine / Biotinyl-L-Threonine / N-(+)-Biotinyl-L-Threonine

偶联方式：生物素的羧基与L-苏氨酸的氨基（或羟基，取决于标记位点）通过酰胺键或酯键连接，常用EDC/NHS催化活化，经柱层析纯化。标记位点通常在L-苏氨酸的α-氨基上，保留游离羧基和侧链羟基。

外观：白色至淡黄色固体粉末

纯度：≥95%

保存条件：-20°C以下，干燥密封，避光保存，避免反复冻融，有效期约12个月

规格：常见25 mg / 50 mg / 100 mg / 500 mg，支持定制

理化特性

溶解性：纯水中溶解度约10–20 mg/mL；易溶于DMSO、DMF（可达50 mg/mL）；在PBS缓冲液（pH 7.4）中可全溶解，溶解度约20–30 mg/mL。

化学稳定性：最适pH 6.0–8.0，最适温度37°C；4–10°C下稳定，10°C储存7天活性下降≤5%；pH<3时酰胺键可能水解，pH>10时生物素环结构可能开环；避免强氧化剂环境。

生物素-亲和素结合能力：保留完整的生物素结合位点，可与链霉亲和素（Streptavidin）或亲和素（Avidin）以较高亲和力结合（Kd约10⁻¹⁵ M），这是该探针的核心功能——通过生物素-亲和素桥接实现信号放大与靶向捕获。

手性保持：使用L-构型苏氨酸，保留天然氨基酸的立体化学特性，可被细胞氨基酸转运体正常识别与摄取。

主要应用方向

1. 氨基酸转运研究：L-苏氨酸是人体必需氨基酸，参与蛋白质合成、甘氨酸代谢及免疫调节。生物素标记后可通过链霉亲和素-HRP/荧光二抗系统，定量检测细胞对L-苏氨酸的摄取效率、转运速率及竞争性抑制，明确LAT1/LAT2等转运体的底物特异性。

2. 代谢通路追踪：追踪L-苏氨酸在细胞内的代谢去向——进入蛋白质合成池、转化为甘氨酸/乙酰CoA、或参与一碳单位代谢，辅助研究氨基酸代谢异常相关疾病。

3. 蛋白质组学亲和捕获：利用生物素-链霉亲和素系统，从细胞裂解液中亲和纯化与L-苏氨酸代谢相关的酶蛋白（如苏氨酸脱氢酶、苏氨酸脱羧酶），辅助蛋白质互作研究。

4. Western Blot检测：作为生物素化底物，通过链霉亲和素-HRP检测特定蛋白的苏氨酸磷酸化修饰（需配合抗磷酸化抗体或质谱验证）。

5. ELISA与免疫检测：生物素标记的氨基酸可作为竞争抑制剂，用于ELISA中定量检测样本中游离L-苏氨酸浓度，灵敏度可达ng/mL级别。

6. 组织化学定位：结合链霉亲和素-荧光偶联物，在组织切片中定位L-苏氨酸在特定组织（如肝脏、脑、肠道）中的分布。

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