Streptavidin-thiol|巯基化链霉亲和素
巯基化链霉亲和素（Streptavidin-thiol），是一种经过化学修饰的链霉亲和素，专门用于生物研究和诊断中的生物素-链霉亲和素系统。以下是对巯基化链霉亲和素的详细介绍：
一、定义与特性
链霉亲和素是一种高亲和力的生物素结合蛋白，通过在其分子结构上引入巯基（-SH）功能团，使其能够进一步与其他分子或表面进行共价连接。这种修饰不仅保留了链霉亲和素对生物素的高特异性和高亲和力，还赋予了其更多的生物化学应用特性。
二、制备步骤
巯基化链霉亲和素的制备通常包括以下步骤：
材料准备：准备链霉亲和素和巯基修饰试剂（如N-琥珀酰亚胺-3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯，SPDP）。
溶解与混合：在适当的缓冲液中溶解链霉亲和素，并配制适当浓度；将修饰试剂溶解在适量的溶剂中，制备高浓度的修饰试剂溶液。
反应：将修饰试剂溶液缓慢加入链霉亲和素溶液中，维持反应体系的pH值在一定范围内（如7.5左右），并在室温下反应一段时间（如1~2小时）。
还原：向反应混合物中加入还原剂（如DL-二硫苏糖醇DTT或三(2-羧乙基)膦TCEP），断开二硫键，释放出巯基（-SH）。反应在室温下进行一段时间（如1小时）。
纯化与保存：通过透析或凝胶过滤去除未反应的修饰试剂和还原剂，得到纯化的巯基化链霉亲和素。将纯化后的溶液分装，并低温保存（如4°C或-20°C），以防止巯基氧化。
三、应用
巯基化链霉亲和素在生物化学、免疫学和纳米技术等领域具有广泛的应用：
表面修饰：可用于修饰金纳米颗粒、电极、微孔板等，通过巯基与金等表面形成稳定的共价键，从而改变这些表面的生物相容性和反应性。
共价连接：可以与其他含有马来酰亚胺或其他巯基反应性基团的分子进行共价连接，用于构建复杂的生物传感器和诊断试剂。
生物素检测：可以结合生物素标记的分子，如抗体、核酸、蛋白质等，在免疫分析、分子生物学实验和细胞成像等领域具有广泛应用。
四、储存条件与安全性
巯基化链霉亲和素应在低温条件下储存，以防止巯基氧化和蛋白质变性。在使用时，应根据具体实验需求调整其浓度，以获得最佳的实验效果。此外，虽然巯基化链霉亲和素在生物研究中具有广泛的应用，但在使用过程中仍需注意其安全性，避免对人体和环境造成危害。
Streptavidin-thiol|巯基化链霉亲和素关于我们:
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